1984年,科学家Galili发现了人体内含量丰富的天然抗体——抗e-半乳糖基抗体(抗-Gal),占循环免疫球蛋白总量的1%。
这种抗体与哺乳动物体内的糖类表位Galel-3Galpl-4GlcNAc-R(即-半乳糖基)有特定的反应。
研究发现,抗-Gal在吞噬衰老红细胞和疾病如Graves病、硬皮病等中起着作用,可能参与了疾病的病理过程。
此外,抗-Gal在异种移植物排斥反应中起主导作用,其独特分布模式和α-半乳糖基表位的研究提供了深入理解。
D-半乳糖,一种六碳醛糖,是乳糖结构的一部分,存在于牛奶中,人体能将其分解为葡萄糖和半乳糖。半乳糖-1-磷酸是半乳糖代谢的起点,通过半乳糖激酶与ATP反应生成,随后进入生物细胞并与糖代谢系统结合。
另一种酶,半乳糖醛酸聚糖酶,主要在植物中存在,负责催化1,4-D-半乳糖醛酸苷键的水解,分为内切酶和外切酶。
而二磷酸尿甘半乳糖(udp-半乳糖)是广泛分布的核苷酸糖,其合成是通过己糖-1-磷酸尿苷酰转移酶的反应。
在细胞内,udp-半乳糖与糖酵解系统或糖互变系统相互作用,而在具有udp-半乳糖焦磷酸化酶的细胞中,半乳糖的代谢过程则有所不同,如人类肝脏的半乳糖代谢活性随年龄增长而增加。
最后,udp-半乳糖在糖苷、多糖、糖蛋白和糖脂的生物合成中扮演着供体角色,其合成过程由特定的半乳糖基转移酶参与。这些酶的特异性对于维持这些生物分子的正常结构至关重要。
半乳糖(CH2OH(CHOH)4CHO)是单糖的一种,可在奶类产品或甜菜中找到。
半乳糖是一种由六个碳和一个醛组成的单糖,归类为醛糖和己糖。
半乳糖是哺乳动物的乳汁中乳糖的组成成分,从蜗牛、蛙卵和牛肺中已发现由D-半乳糖组成的多糖。
它常以D-半乳糖苷的形式存在于大脑和神经组织中,也是某些糖蛋白的重要成分。
d半乳糖溶液配制方法给细胞
小球藻含丰富的蛋白质、脂质、多糖、食用纤维、维生素、微量元素和活性代谢产物,具有防治消化性溃疡、抗肿瘤、增强免疫、抗辐射、抗病原微生物、防治贫血、降血脂和抗动脉粥样硬化等保健和药理作用。
绿藻门小球藻属ChlorellaBeij.为普生性单细胞绿藻,种类繁多。
小球藻能适应于不同的生长环境,在人工培养基中生长良好,除能利用光能自养外,还可以利用有机碳源进行异养生长。
小球藻含丰富的蛋白质、多糖、脂质、叶绿素、维生素、微量元素和一些生物活性代谢产物。
自1962年日本学者Yamagi-shi报道小球藻对胃溃疡有治疗作用以来,人们对小球藻的药理作用进行了广泛的研究,发现小球藻具有防治消化性溃疡、抗肿瘤、增强免疫、抗辐射、抗病原微生物、防治贫血、降血脂和抗动脉粥样硬化等药理作用,在日本已经用于临床作为辅助治疗药物[1]。
现将小球藻的保健和药理作用研究状况作一综述。
1防治消化性溃疡小球藻对消化性溃疡的作用在动物实验已得到证实[2]。
经口给予实验鼠普通小球藻干粉,对水浸应激反应诱导和半胱胺诱导的消化性溃疡模型有明显的预防作用,能增强防溃疡形成的保护因素。
作用机制可能是通过“免疫-脑-肠”轴阻止溃疡形成和通过自身特点保护胃粘膜。
2抗肿瘤小球藻抗肿瘤的机制有:1)抑制致癌物的诱变性和基因毒性;2)使多形核细胞(PMN)增生,与宿主或受体一起作用;3)通过抗原专一性免疫,使T细胞增殖和活化等。
Nomoto等[3]研究了从普通小球藻S-50抽提的水溶物质PCM-4对移植鼠肿瘤的抗肿瘤活性。
经口和腹腔给予PCM-4后,S180和MethA的生长以及腹水肝癌AH44、AH41C的生长均受到抑制。
体外实验表明,PCM-4的抗肿瘤作用是从宿主调节反应系统引出的。
Konishi等[4]给接种了MethA肿瘤细胞的BALB/c小鼠腹腔注射普通小球藻热水抽提物(CVE)后,小鼠的生存时间显著延长。
用正常受体的Winn型检测,发现给予CVE后24h腹腔渗出液细胞(PEC)含大量多形核细胞(PMN),具有抗肿瘤作用。
他们发现CVE诱导的抗肿瘤作用是由PMN与宿主或受体一起作用而表达的。
经口给予带MethA瘤的BALB/c小鼠或CDF1小鼠普通小球藻或其丙酮提取物,MethA肿瘤生长也受到显著抑制,这种抑制是通过抗原专一性方式发生的[5]。
Tanaka等[6]经研究发现普通小球藻CK22藻株的一种糖蛋白提取物CVS对小鼠实验和自发肿瘤转移有显著的抑制作用。
CVS的这种对肿瘤转移的抑制作用在肿瘤内给药再加皮下注射可得到加强。
CVS的抗肿瘤活性在抗原专一性T细胞调节的免疫中反映出来。
CD4和CD8T淋巴细胞均有抗肿瘤作用。
在肿瘤再次发生时注射CVS,CD4阳性细胞数量在淋巴结中明显增加。
因此,CVS诱导了带瘤鼠周围淋巴结中T细胞的活性。
CVS通过淋巴器官中T细胞活化和向肿瘤部位补充T细胞来增强抗转移免疫性。
手术前使用CVS可能阻止转移或防止肿瘤进一步恶化。
从普通小球藻培养基中纯化了一种具有抗肿瘤活性的物质(ARS2),质谱分析发现是一种糖蛋白,相对分子量63000,含66.9%糖(主要是D-半乳糖),35.2%蛋白质,糖部分有-β-1,6-D-半乳吡喃糖支架,蛋白质N端的15个氨基酸序列是抗肿瘤活性所必需的[7]。
流行病学研究表明,黄-绿蔬菜对人类免受癌症有保护作用,Negishi报道[8],从普通小球藻制备的叶绿素抑制了沙门氏菌中3-羟氨基-1-甲基-5H-吡啶(4,3-b)吲哚的诱变性,还抑制果蝇中4-硝基喹啉1-氧化物(4-nitroquinoline1-oxide,4NQO)的基因毒性。
3增强免疫Hasegawa等[9]报道经口给予小鼠CVE(20毫克/鼠,连续10d),可加强鼠对腹腔注射李斯特菌单细胞基因感染的抵抗力。
给予CVE的小鼠腹腔或脾脏中的细菌数量显著低于对照组。
研究了小球藻对患鼠艾滋病小鼠免疫功能的影响[10,11]。
通过感染鼠白血病病毒LP-BM5可使鼠患艾滋病,这种鼠对感染了李斯特菌单细胞基因的细菌清除能力下降。
给予CVE可恢复小鼠清除李斯特菌单细胞基因能力,促进对该基因的免疫反应,增加感染部位CD4+、CD8-和CD4、CD8+αβT细胞数量。
为了进一步探讨CVE加强细胞调节的免疫机制,研究了对正常小鼠和单细胞基因感染后经口给予CVE的mRNA表达细胞因子的情况。
提示CVE主要通过激活巨噬细胞产生IL-12和加强宿主对李斯特菌感染的抵抗力来增强对李斯特菌的免疫反应。
表明小球藻可能对治疗逆转录病毒诱发的免疫缺陷病人的伴发感染有效。
Konishi等[12]检测了CVS对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的骨髓抑制和抗感染能力的影响。
皮下给予CVS可显著减少不带瘤鼠给予高剂量5-FU的死亡率,增加5-FU的LD50。
CVS能加速5-FU诱导的骨髓抑制的恢复。
带瘤鼠在5-FU治疗期间给予CVS,延长了小鼠的存活期,且不影响5-FU的抗肿瘤作用。
此外,CVS本身也有抗肿瘤作用。
这些结果表明CVS可减轻癌症化疗的副反应,且不影响化疗药物的抗肿瘤作用。
Hasegawa发现CVE可以减轻Cy引起的骨髓抑制,增强对细菌感染的抵抗力[13]。
进一步研究了CVE经过提纯的成分CVE-A对Cy处理鼠白细胞数的恢复和对抵抗细菌感染力的增强作用[14]。
Cy处理后第4天,鼠对腹腔感染大肠杆菌高度敏感,给予cVE-A增强了其对大肠杆菌感染的抵抗力。
表明CVE-A可用作白细胞减少患者对感染的非专一性抵抗力的有效刺激物。
4抗病原微生物Ibusuki等[15]研究了CVE对小鼠宿主调节的抗巨细胞病毒感染的作用。
在感染病毒前3d和前1d给予小鼠10mgCVE,小鼠可在致死性感染中存活下来。
CVE的保护作用表现在给予了CVE的小鼠目标器官中感染病毒的复制减少,使目标器官免受巨细胞病毒感染引起的组织病理学损害,使血清干扰素水平和2′,5′-寡腺苷酸(2-5A)合成酶活性升高,脾脏中NK活性显著增强(通常可被致死性巨细胞病毒感染破坏)。
由于没有观察到CVE对巨细胞病毒的杀病毒和稳定病毒活性,因此CVE诱导的对鼠巨细胞病毒的抵抗力应是通过宿主调节的。
腹腔、静脉或皮下给予从普通小球藻水提物中渗析提纯的一种水溶性、高分子量物质(CVE-A),增强了腹腔接种大肠杆菌小鼠的抵抗力,剂量大于0.2mg/kg体重,在感染前1、4或7d给予,可增强对脾脏中细菌的清除。
这可能是由于经CVE-A处理后加快过氧化物产生和多形核细胞的化学激活作用[16]。
5防治缺铁性贫血Sonada发现小球藻抽提物对妊娠贫血有治疗作用。
Matsuura等[17]进行了系统的动物实验研究,发现一定剂量的小球藻可以治疗缺铁性贫血。
6抗高脂血症和动脉粥样硬化Sano等[18]用日本白兔研究了普通小球藻干粉(CVP)的抗脂质血症和抗动脉粥样硬化活性。
给予大鼠10周高胆固醇饲料,可显著提高血浆总胆固醇和β-胆固醇水平,造成主动脉的粥样硬化损害。
加1%CVP抑制了血浆总胆固醇和β-胆固醇的升高和主动脉的粥样硬化损害。
降血脂药安妥明作为阳性对照,无论对血脂水平升高还是对主动脉的粥样硬化损害都无任何作用。
7抗辐射Singh等[19]发现小鼠接受亚致死剂量γ射线前后经口给予CVE-25,增加了内源性脾克隆形成单位(endogenousspleencolonyformingunits,E-CFU),这种放射保护的幅度与剂量和给药时间有关,获得最佳的E-CFU的给药方式是照射前或照射后立即给予0.5g/kg体重。
给予小球藻后脾脏重量和骨髓细胞明显恢复,并提高了小鼠接受γ射线的LD50水平(给予小球藻后的LD50为9.0Gy,对照组为7.8Gy)。
微核试验研究表明,CVE-25对整体照射鼠有调节γ射线诱导的染色体损害的作用。
在急性或慢性预处理中都观察到显著的放射保护作用,但剂量需大于400mg/kg体重。
照射后0.4h内给予CVE-25也有显著的放射保护作用。
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