同位素标记法和荧光标记法的区别(同位素标记法和荧光标记法的区别在哪)

荧光物标记法，神经纤维的末梢可以吸收很多荧光化合物或荧光染料,经轴突逆向运输到细胞体内,从而建立逆行荧光标记法。

例如:Kuypers等(1977)用这种方法在荧光显微镜下根据所用荧光物标记物特有的波长显示吸收荧光物的神经细胞。

目前用于神经元标定的荧光物质有十多种。可以根据实验的要求进行单荧光物、双标定和三标定。后者可以用来做神经元轴突侧枝投射的追踪。

1.SYBRgreenI染料

反应体系中，加入过量SYBR

荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的扩增完全同步。

其优点是对模板没有选择性，使用方便，非常方便，但也易与非特异性双链DNA结合，产生假阳性，可以通过溶解曲线的分析，优化反应条件。

2.Taqman探针

目前在Real-time

Q-PCR中最广泛使用的Tagman系统就是运用了这个原理。

它能被DNA合成酶（例如Taq酶）的5'-3'活性所降解，探针的5'端有一荧光报告基团，3'端有一荧光淬灭基团。

当两个基团相互先靠近的时候，由于发生能量传递作用，报告基团不能发出荧光，但随着扩增反应的进行，5'端得报告基团随着探针的水解而脱落下来，不再与淬灭发生能量传递作用，从而能发出荧光，被信号探测器所捕获。

3.Scorpions

它由两个寡核苷酸分子组成，一个是引物，另一个是带荧光分子的探针，但是此探针也具有引物的功能。引物与形成发夹结构的探针相连，在探针上由于荧光报告基团与淬灭基团相互靠近，不发荧光。

变性阶段，探针的发夹结构会解开，在退火时则与模板相结合，形成线性分子，报告基团同淬灭基团分离而发射荧光。

在探针的设计上，要求绝对保守，长度为25-32bp，Tm在68-70度之间，探针的5'端不能为G，避免多个碱基同时出现，尤其要避免4个G同时出现，另外，探针应靠近上游引物。

4.分子信标

分子信标是（Molecular

beacon）是一种呈发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。

荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭，由荧光基团产生的能量以红外光而不是可见光形式释放出来。在复性温度下，因为模板不存在时形成茎环结构。

当加热变性会互补配对的茎环双链解开，如果有模板存在环序列将与模板配对。与模板配对后，分子信标将成链状而非发夹装，使得荧光基团与淬灭剂分开。当荧光基团被激发时，淬灭作用被解除，发出激光分子。

同位素标记法和荧光标记法的区别在哪

网上找到的

常用技术方法

(一)同位素标记法

同位素用于追踪物质的运行和变化规律。用示踪元素标记的化合物，化学性质不会改变。人们可以根据这种化合物的放射性，对有关的一系列化学反应进行追踪。这种科学研究方法叫做同位素标记法，也叫同位素示踪法。

可用于研究细胞内的元素或化合物的来源、组成、分布和去向等，进而了解细胞的结构和功能、化学物质的变化、反应机理等。如3H、14C、15N、18O、32P、35S等。

1.科学家利用“同位素标记法”弄清了许多化学反应的详细过程．下列说法正确的是。

A．用14C标记CO2最终探明了CO2中碳元素在光合作用中的转移途径。

B．用18O标记H2O和CO2有力地证明了CO2是光合作用的原料。

C．用15N标记核苷酸弄清了分裂期染色体形态和数目的变化规律。

D．用35S标记噬菌体的DNA并以此侵染细菌证明了DNA是遗传物质A。

（二）荧光标记法。

同位素标记法和荧光标记法的区别：同位素标记法通常采用放射性同位素标记物质中的分子原子，荧光标记法通常是借助荧光分子来标记蛋白质。一个是元素标记，另一个是分子标记。

2.现代分子生物学采用的测定基因在染色体上位置的方法是。

A.杂交法B.测交法C.荧光标记法D.X射线衍射法C。

（三）差速离心法

用高速离心机在不同的转速下进行离心，利用不同的离心速度所产生的不同离心力，就能将各种细胞细胞分开

（四）分子杂交技术：

根据某些物质分子之间特异性识别和结合的性质，利用已有的物质分子对未知物质分子进行检测的技术。

3.用某人的胰岛素基因制成的DNA探针，检测下列物质，不能形成杂交分子的是，。

A．该人胰岛A细胞中的DNAB．该人胰岛B细胞的MrnaC．该人胰岛A细胞的mRNAD．该人肝细胞的DNAC。

二．科学研究方法

（一）类比推理

根据两个对象之间有某些性质相同，从而推测它们的其他性质也相同的方法。应当注意的是，类比推理的结论具有偶然性，可能是正确的，也可能是错误的，其证实或证伪还需要通过观察或实验。