植物组织培养用什么培养基
用于植物组织培养的培养基MS是最优的了
其它培养基也有用的
但较少。
B5培养基:
B5培养基的主要特点是含有较低的铵,这是因为铵可能对不少培养物的生长有抑制作用.经过试验发现,有些植物的愈伤组织和悬浮培养物在MS培养基上生长得比B5培养基上要好,而另一些植物,在B5培养基上更适宜.
N6培养基:
N6培养基特别适合于禾谷类植物的花药和花粉培养,在国内外得到广泛应用.在组织培养中,经常采用的还有怀特培养基、尼许培养基等.它们在基本成分上大同小异.怀特培养基由于无机盐的数量比较低,更适合木本植物的组织培养.
常见植物培养基有哪些
植物组织培养基成分主要有5类,分别是无机营养物、碳源、维生素、有机附加物、生长调节物质。
1、无机营养物
无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成。
大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势。
而钙、钠、镁的需要则较少。
培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。
微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。
培养基中的铁离子,大多以螯合铁的形式存在,即FeSO4与Na2—EDTA的混合。
2、碳源
培养的植物组织或细胞,它们的光合作用较弱。因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起重要作用。
3、维生素
在培养基中加入维生素,常有利于外植体的发育。培养基中的维生素属于B族维生素,其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。
4、有机附加物
包括人工合成或天然的有机附加物。最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。另外,琼脂也是最常用的有机附加物,它主要是作为培养基的支持物,使培养基呈固体状态,以利于各种外植体的培养。
5、生长调节物质
常用的生长调节物质大致包括以下三类:
、植物生长素类。如吲哚乙酸、萘乙酸、2,4-二氯苯氧乙酸。
、细胞分裂素。如玉米素、6-苄基嘌呤和激动素。
、赤霉素。组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸。
常用植物培养基配方
培养基的配制:配制培养基时通常以1升为一个容量单位,先在量筒内放少量50摄氏度左右的蒸馏水,再按配方中所列顺序逐个投药,待一种药剂溶化后再放另一种药剂,药剂全部溶化后,根据需要再加入一定量的生长调节物质,补充蒸馏水至1升,最后加入加热熔化好的琼脂。
这时将配好的培养基再用1摩尔的NaOH调整pH。
调整时用酸度计或精密试纸测定,使之达到培养基的酸碱度要求。
调好酸碱度后趁热分装试管或三角瓶中,盖好棉塞,做上标记。
待琼脂冷凝后再用牛皮纸包扎,然后放入高压锅中灭菌,压力为1.2千克/平方厘米,保持20分钟即可。
冷却后可放培养室预培养3天,没有杂菌污染则可取花卉材料进行接种。
要注意,培养基配好后应立即进行高压灭菌,以防腐败变质。
常用培养基的种类7种
培养基的种类有:
1、按照培养基的成分来分,可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类;
2、按照培养基的物理状态分,可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类;
3、按照微生物的种类分,可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类;
4、按照培养基用途分,可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。
植物组培培养基
植物组培常用培养基如下
MS培养基是目前普遍使用的培养基。
它有较高的无机盐浓度,对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利。
MS固体培养基可用来诱导愈伤组织,或用于胚、茎段、茎尖及花药培养,它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。
B5培养基的主要特点是含有较低的铵,这是因为铵可能对不少培养物的生长有抑制作用。有些植物的愈伤组织和悬浮培养物在MS培养基上生长得比B5培养基上要好,而另一些植物,在B5培养基上更适宜。
N6培养基特别适合于禾谷类植物的花药和花粉培养。
怀特培养基由于无机盐的数量比较低,更适合木本植物的组织培养。
ms培养基中加入蔗糖的作用
的植物组织培养基中,需要添加碳水化合物作为碳源材料,使糖的植物组织培养的成功关键之一。
清除高中生物课本,植物组织培养基中添加糖是蔗糖。
那么,为什么不添加葡萄糖呢?解释作为蔗糖比葡萄糖便宜,易于植物细胞的吸收了大量的信息。
事实并非如此。
的原因为何蔗糖作为碳源,有两个主要的原因:
(1)相同的作为碳源提供能量来源,是植物细胞,蔗糖比葡萄糖能够更好地调节介质内的渗透压。
形成介质渗透蔗糖相同的质量分数的显着低于葡萄糖的制备,使用葡萄糖作为碳源,易使植物细胞脱水和生长不良。
同时,植物细胞吸收蔗糖的速率明显慢于对葡萄糖的吸收率,蔗糖形成的重量克分子渗透压浓度可以相对长期稳定。
(2)植物组织培养的过程中,我们应始终注意防止介质中的微生物污染。是最常用的微生物生长的碳源是葡萄糖,并且很少使用蔗糖。因此,在使用蔗糖作为碳源的培养基中,可在一定程度上减少微生物污染。
(3)诱导作用。
在培养基成分,增加的生长素的浓度,木质部,蔗糖浓度增加,由此产生在韧皮部形成。
生长素的电平保持恒定时,2%蔗糖的分化满分所有木质部,4%的蔗糖,使几乎所有的分化是韧皮部,和3%蔗糖,可区分两者。
所以,生长素和蔗糖浓度确定血管性愈伤组织的类型功梗哆妓馨幻鹅潍珐璃和数量。
因此,植物组织培养中的蔗糖选择不选择葡萄糖。
植物组织培养中,在培养基中的蔗糖浓度为低,一般为3%?
10%,而30%的蔗糖的质壁分离,可见浓度的大的间隙,质壁分离的浓度,因为时间是短暂的,细胞吸收少量,而不是不能吸收足够的细胞液的渗透压出现质壁分离。
只要浓度不太高,时间足够长的时间,然后蔗糖形式的被动扩散进入植物细胞和植物。
植物蔗糖酶,可以吸收和利用蔗糖。
转化酶在高等植物蔗糖代谢中起着关键作用。
有研究表明,转化酶参与植物生长,器官内置糖转运,植物培养液加蔗糖。
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