苏木精-伊红染色法,简称为HE染色法,是石蜡切片技术中常用的染色方法之一。
这种染色法主要使用碱性染料苏木精,它能使细胞核内的染色质和胞质内的核糖体呈现紫蓝色。
而酸性染料伊红则主要负责染色细胞质和细胞外基质,使其呈现红色。
在组织学、胚胎学、病理学教学与科研中,HE染色法是最基本、应用最广泛的技术之一。
实验步骤包括以下几步:
1.石蜡切片脱蜡至水:将切片依次放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ、75%酒精中,每次浸泡5分钟,然后自来水冲洗。
2.苏木素染色:将切片放入苏木素染液中染色3-5分钟,随后自来水冲洗,使用分化液进行分化,再次自来水冲洗,最后用返蓝液进行返蓝,并流水冲洗。
3.伊红染色:将切片依次放入85%、95%的梯度酒精中脱水各5分钟,然后放入伊红染液中染色5分钟。
4.脱水封片:将切片依次放入无水乙醇I、无水乙醇II、无水乙醇Ⅲ、二甲Ⅰ、二甲苯Ⅱ中,每次浸泡5分钟,使其透明,最后用中性树胶进行封片。推荐使用HE染液套装,厂家为Servicebio。
结果判读:在HE染色后的切片中,细胞核呈现蓝色,细胞质呈现红色。
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