这个配方不用购买了,一般公司的目录上有的。象宝生物目录上比较全。或者在网上找一找。又不是什么专利配方。如果用量少,可以买现成的,如果用量大,当然是买来原料自己配了。
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲夜配制量:1升。
所用试剂:Tris碱,甘氨酸和SDS
配方:15.1Tris碱
94g甘氨酸
50ml10%SDS
或5gSDS
用900ml水充分溶解后,pH值约为8.4,用少量浓盐酸(约2.5ml)调至pH8.3,定容至1升,室温贮存备用。
使用时,直接用双蒸水稀释五倍(100ml缓冲液+400ml双蒸水,混匀,常温保存)。一般此电泳液可反复使用三到五次,如果发现有明显沉淀或者漂浮时,请丢弃换新的。
10×电转液(1L)
所需试剂:Tris,甘氨酸和SDS
配方:30.3gTris
144g甘氨酸
3.7gSDS(如有必要可加)。
用800ml蒸馏水溶解后定容至1L。分装室温储存。
电泳液怎么配制
1.丙烯酰胺贮液(30%丙烯酰胺,交联度2.6%):,30g丙烯酰胺和0.8g甲叉双丙烯酰胺溶于H2O,定容至100ml,滤去不溶物后存于棕色瓶,4℃可保存数月。
(全班公用)(另一配方为29.1g丙烯酰胺和0.9g甲叉双丙烯酰胺溶于H2O,定容至100ml,交联度为3.0%)。
2.两性电解质Amphline(40%)的加入量为:50ml/ml胶液。
3.过硫酸胺:配成1mg/ml的浓度,当天配制,配100ml全班公用。胶液中的加入量为0.5mg/ml胶液。
4.TEMED:胶液中的加入量为1ml/ml胶液。
5.蛋白质样品:选用两种等电点相差较大的蛋白质,每根垂直管中每种蛋白质的加样量控制在<100mg。蛋白质样品配制成各为5mg/ml的浓度。配2.5ml全班公用。
6.固定液:10%的三氯乙酸,每组配50ml。
7.阳极电极液:0.1MH3PO4
3.4ml浓磷酸(85%)加H2O至500ml,每个电泳槽用500ml。
8.阴极电极液:0.5MNaOH
2gNaOH加H2O溶解至500ml,每个电泳槽用500ml。
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